1）擴增產物長度 100 bp-150 bp 為佳；

2）引物長度 17 bp-25 bp 最好；

3）正向引物和反向引物的 Tm 值最好相差不要超過 1℃。Tm 值調整至 60℃-65℃為佳；

4）引物的 GC 含量控制在 40%-60%之間，最佳為 45%-55%；

5）引物 3'末端堿基最好為 G 或 C 或 A，避免使用 T；

6）避開引物內部或者兩條引物之間有 3 個堿基以上的互補序列，二條引物之間的 3'端避開有 2 個堿基以上的互補序列；

7）引物 A、G、C、T 整體分布盡量要均勻，避免使用 GC 或者 TA 含量高的區域，尤其是 3'端，必須避開 GC 含量不均勻的區域；

8）最好跨內含子設計引物。

深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術實力、壹流的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司，旨在為生命科學的發展提供壹流的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線，在各個領域內向用戶提供世界前沿水平和質量穩定的產品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優質客戶提供優質的產品、技術支持與服務。